Категории

Набор реагентов для определения содержания глюкозы

Глюкометр: принцип работы, виды, как пользоваться и где купить

Набор «Глюкоза-ФКД» (упаковка № 10) 1000 мл (1000 определений)

Регистрационные удостоверения (Россия, Казахстан, Украина)

Каталожный № 10757 (400 мл) КУПИТЬ

Зам. руководителя Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники МЗ РФ А.А. Топорков 17.07.2001 г.

Рекомендована к утверждению Комиссией по лабораторным реагентам Комитета по новой медицинской технике МЗ РФ (протокол № 9 от 30.10.2000 г.)

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора реагентов для определения глюкозы в биологических жидкостях глюкозооксидазным методом

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор предназначен для количественного и качественного колориметрического определения концентрации глюкозы в сыворотке и плазме крови, цельной крови и моче человека глюкозооксидазным методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 400 определений при расходе 1,0 мл рабочего раствора на один анализ.

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Глюкозоксидаза окисляет D-глюкозу до глюкуроновой кислоты с образованием перекиси водорода; последняя под действием пероксидазы реагирует с 4-аминоантипирином и фенолом с образованием соединения красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации глюкозы в анализируемом образце и измеряется фотометрически при длине волны 510 (470–540) нм.

СОСТАВ НАБОРА

1. Концентрат буфера с фенолом (фенол — 20,7 г/л, калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный — 137 г/л, калий фосфорнокислый однозамещенный — 55 г/л), 10 мл — 2 флакона.

2. Субстратно-ферментная смесь сухая (4-аминоантипирин — 0,032 г, глюкозооксидаза — 3000 МЕ, пероксидаза — 300 МЕ) — 2 флакона.

3. Антикоагулянт сухой (натрий хлористый — 4,2 г, натрий фтористый — 0,11 г, этилендиамин-N,N,N`,N`-тетрауксусной кислоты динатриевая соль 2-водная — 0,2 г) — 1 упаковка.

4. Калибровочный раствор глюкозы (глюкоза — 10 ммоль/л, бензойная кислота — 1,8 г/л), 2,0 мл — 1 флакон.

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Линейная область определения концентрации глюкозы — в диапазоне от 2 до 20 ммоль/л, отклонение от линейности — не более 5%.

Чувствительность определения — не более 1 ммоль/л.

Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 5%.

Нормальные величины концентрации глюкозы составляют:

     — для сыворотки крови и плазмы крови 3,9–6,1 ммоль/л;

     — для цельной крови 3,3–5,5 ммоль/л;

     — для мочи не более 0,5 ммоль/л.

Качество набора можно оценивать по контрольным сывороткам отечественного или зарубежного производства, аттестованными данным методом. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

При работе с набором необходимо соблюдать правила техники безопасности, рекомендуемые при работе с кровью в соответствии с «Инструкцией по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебных и профилактических учреждений», утвержденной Минздравом СССР от 17.01.91 г. и «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (М., 1981 г.). При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять или передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

— Спектрофотометр, длина волны 510 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 470–540 нм (зеленый светофильтр), кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 или 5 мм;

— пипетки, позволяющие отбирать объем жидкости 0,01 и 1,0 мл;

— колбы мерные вместимостью 200 и 500 мл;

— пробирки центрифужные вместимостью 5–10 мл;

— термостат, обеспечивающий температуру +37° С;

— центрифуга лабораторная на 3000 об/мин;

— секундомер; — вода дистиллированная;

— перчатки резиновые или пластиковые.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Негемолизированная сыворотка или плазма крови, цельная кровь, моча.

ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

Рабочий раствор. В мерной колбе вместимостью 200 мл последовательно растворить в дистиллированной воде содержимое одного флакона концентрата буфера с фенолом и одного флакона сухой субстратно-ферментной смеси, затем довести объем дистиллированной водой до метки. Рабочий раствор можно хранить в темном месте в плотно укупоренной посуде при температуре +2–8° С не более 1 месяца.

Антикоагуляционный раствор (для определения глюкозы в цельной крови). Содержимое упаковки с сухим антикоагулянтом количественно перенести в мерную колбу вместимостью 500 мл, растворить в дистиллированной воде и довести объем дистиллированной водой до метки. Антикоагуляционный раствор можно хранить в плотно укупоренной посуде при температуре +2–8° С не более 3 месяцев.

Калибровочный раствор глюкозы готов к применению.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

1. Определение глюкозы в сыворотке (плазме) крови и моче.

Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 1.

Таблица 1

Содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать в течение 15 минут при температуре +37° С или в течение 30 минут при комнатной температуре (+18–25° С). Через 5–10 минут после начала инкубации пробирки интенсивно встряхнуть. После окончания инкубации измерить величину оптической плотности калибровочной и опытных проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 510 (470–540) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 или 5 мм. Окраска устойчива в течение 1 часа после окончания инкубации.

Концентрацию глюкозы рассчитать по формуле:

где: С — концентрация глюкозы в опытной пробе, ммоль/л;

       Eо — оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;

       Eк — оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;

       10 — концентрация глюкозы в калибровочном растворе, ммоль/л.

Примечание: при использовании кювет другого объема расход реагентов может быть пропорционально изменен с сохранением соотношения объема анализируемого образца к объему рабочего раствора 1:100.

2. Определение глюкозы в цельной крови.

Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 2.

Таблица 2

Дальше определение, измерение оптической плотности и расчеты проводить так, как это указано для сыворотки (плазмы) крови.

3. Качественное определение глюкозы в моче.

В центрифужной пробирке смешать 0,2 мл рабочего раствора, 0,02 мл мочи и инкубировать в течение 15–20 минут при комнатной температуре (+18–25° С). Пробы мочи, вызывающие покраснение реакционной смеси, считать положительными.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре +25° С не более 5 суток. Срок годности набора — 2 года. Рабочий раствор может хранится в темном месте в плотно укупоренной посуде при температуре +2–8° С не более 1 месяца. Антикоагуляционный раствор может храниться в плотно укупоренной посуде при температуре +2–8° С не 3 трех месяцев. Калибровочный раствор глюкозы после вскрытия флакона может храниться в укупоренном виде при температуре +2–8° С не 3 трех месяцев. При получении значений концентрации глюкозы выше 20 ммоль/л анализируемый образец необходимо развести дистиллированной водой в соотношении 1:1, повторить анализ и полученный результат умножить на 2.

По вопросам, касающимся приобретения наборов и их качества, просим обращаться по адресу: 105173, г. Москва, ул. Западная, д. 2, стр. 1, ООО «Агат—Мед». Телефон для справок: (495) 777-41-92.

Инструкция составлена: к.б.н. И.В. Смирновым — зав. лабораторией ГНЦ РАМН, В.В. Майоровой — научным сотрудником ООО «Агат-Мед».

          Eо

С =    ------------------   х 10 ,

          Eк



Регистрационные удостоверения

Назад к списку инструкций

Источник: http://www.agat.ru/documents/instructions/4997/

ГЛЮКОЗА АГАТ

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора реагентов для количественного определения содержания глюкозы
в сыворотке и плазме крови человека глюкозооксидазным методом

«ГЛЮКОЗА - UTS»

Набор «ГЛЮКОЗА - UTS» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ.

Регистрационное удостоверение № ФСР 2009/05457

Информация для заказа набора «ГЛЮКОЗА - UTS»

Кат. №

Комплектация

Количество определений

ГЛ

реагент 100 мл + калибратор 1 мл

100/v

ГЛ

реагент 400 мл + калибратор 4 мл

400/v

где v – объем фотометрической ячейки анализатора.

1. НАЗНАЧЕНИЕ

1.1. Набор реагентов «ГЛЮКОЗА - UTS» предназначен для определения концентрации глюкозы в сыворотке и плазме крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний и контроля проводимого лечения пациентов.

1.2. Глюкоза является одним из важнейших компонентов крови, ее количество отражает состояние углеводного обмена. Содержание глюкозы в крови повышается при сахарном диабете, эпидемическом энцефалите, повышении гормональной активности щитовидной железы и т. д. На этом основано клиническое значение анализа.

1.3. Потенциальный риск применения набора – класс 2а. Основной риск косвенный и связан с возможностью получения неверного результата анализа, что может привести к неправильно поставленному диагнозу и назначению неэффективного лечения пациента. Для снижения указанного риска необходимо в каждой аналитической серии контролировать качество результатов анализов с применением контрольных сывороток в соответствии с ОСТ 91500.13..

2. ПРИНЦИП МЕТОДА

2.1. Глюкозооксидаза катализирует окисление β-D-глюкозы с образованием эквимолярных количеств глюконовой кислоты и перекиси водорода (1). Перекись водорода под действием пероксидазы в реакции с 4-аминоантипирин и фенолом образует окрашенный продукт – хинонимин (2), интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации глюкозы в анализируемом образце и измеряется фотометрически при длине волны нм [1,2].

β-D-Глюкоза + H2O + O2 Глюкозооксидаза Глюконовая кислота + Н2О2 (1)

 

2Н2О2 + 4-аминоантипирин + Фенол Пероксидаза Хинонимин + 4Н2О (2)

2.2. Фотометрическое измерение основано на наличии пика поглощения с максимумом при длине волны 505 нм молекулами хинонимина. Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет при этой длине волны. Таким образом, увеличение оптической плотности реакционной смеси пропорционально интенсивности окраски хинонимина и, следовательно, прямо пропорционально концентрации глюкозы в пробе.

3. СОСТАВ НАБОРА

3.1. Набор реагентов «ГЛЮКОЗА - UTS» поставляется в виде двух растворов: Реагента и калибратора.

Компоненты и их состав:

Наименование

Состав

Концентрация

Реагент

Фосфатный буфер, pH 7,5

Фенол

Глюкозооксидаза

Пероксидаза

4-аминоантипирин

100 ммоль/л

5 ммоль/л

>10 000 MЕ/л

>2 000 MЕ/л

0,5 ммоль/л

Калибратор

Водный раствор глюкозы

5,55 ммоль/л

4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

4.1. Набор обеспечивает линейную область определения концентрации глюкозы в диапазоне от 0,5 до 25 ммоль/л, отклонение от линейности не превышает 2,5%.

4.2. Чувствительность – не более 0,5 ммоль/л

4.3. Воспроизводимость - коэффициент вариации результатов определений – не более 2,5%.

4.4. Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным глюкозооксидазным методом.

4.5. Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется использовать сывороточные калибраторы, аттестованные по концентрации глюкозы глюкозооксидазным методом.

4.6. Нормальные величины концентрации глюкозы в сыворотке или плазме взрослого человека составляют 4,1-5,9 ммоль/л [3].

4.7. Перечень лекарственных препаратов, влияющих на определение концентрации глюкозы, приведены в обзоре [4].

5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

5.1. Реагент содержит фенол и 4-аминоантипирин. Следует избегать попадания этих реагентов на кожу и слизистые. В случае попадания их на кожу и слизистые оболочки необходимо промыть поражённые участки большим количеством проточной воды.

5.2. При выполнении лабораторного исследования необходимо соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).

5.3. При работе с биологическими пробами следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т. к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

6.1. Для выполнения анализа по определению концентрации глюкозы с применением набора реагентов «ГЛЮКОЗА – UTS» рекомендуется использовать фотометр, фотоэлектроколориметр, полуавтоматический или автоматический биохимический анализаторы, позволяющие выполнять измерение поглощения оптической плотности при длине волны нм (режим по конечной точке), и обеспечивающие термостатирование фотометрической ячейки при температуре

+(37±0,5) ОС.

6.2. Общелабораторное оборудование.

7. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

7.1. Негемолизированная сыворотка или плазма крови.

7.2. Сыворотку или плазму крови следует отделить от форменных элементов крови немедленно после взятия крови.

7.3. Для замедления гликолиза и предотвращения свертывания при заборе крови использовать пробирки, содержащие антикоагулянт фторид натрия.

7.4. Образцы сыворотки или плазмы для проведения анализа на содержание глюкозы стабильны не более 3-х суток при +(2-8) ОС [3].

8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

8.1. Реагент и калибратор готовы к использованию.

8.2. Проведение ручного анализа с использованием фотометра или фотоэлектроколориметра.

8.3. Отобрать компоненты реакционной смеси с использованием пипеточных дозаторов в объемах, указанных в таблице:

Внести в кювету

Анализируемая проба, мкл

Калибровочная проба, мкл

Холостая проба, мкл

Реагент

1000

1000

1000

Калибратор

10

H2O

10

Сыворотка или плазма крови

10

8.4. Пробы тщательно перемешать и инкубировать при температуре +(37±0,5) ОС в течение 5 минут или при комнатной температуре (+18…+25 ОС) в течение 10 минут.

8.5. Измерить оптическую плотность анализируемой пробы и калибровочной пробы против холостой пробы в оптической кювете при длине волны нм. Окраска раствора стабильна в течение 30 минут.

Концентрацию глюкозы в сыворотке крови или плазме (ммоль/л) определить по формуле:

где: С – концентрация глюкозы в анализируемом образце сыворотки или плазмы в моль/л;

Аобр – оптическая плотность анализируемой пробы отн. холостой пробы, ед. опт. плотн.;

Акал – оптическая плотность калибровочной пробы отн. холостой пробы, ед. опт. плотн.;

Cкал – концентрация глюкозы в калибраторе, равная 5,55 ммоль/л.

8.6. Если полученная концентрация глюкозы в образце выше 25 ммоль/л, то исследование следует повторить: разбавить анализируемый образец 0,9% раствором NaCl в соотношении 1:1 и полученный результат определения умножить на 2.

8.7. Для выполнения измерений на полуавтоматическом или автоматическом биохимическом анализаторах следует:

8.7.1. Установить программу определения концентрации глюкозы согласно таблице:

Наименование параметра

Значение

Метод измерения

Конечная точка

Длина волны, нм

Основная , дифференциальная 600

Измерение против

дист. вода

Температура реакции

37 ОС

Единица измерения

ммоль/л

Число знаков после запятой

2

Изменение оптической плотности

Увеличивается

Соотношение реагент/проба

100:1

Концентрация калибратора, ммоль/л

5,55

Время реакции, мин

5 (37 ОС)

Верхний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.

0,3

Нижний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.

0

Границы линейности, ммоль/л

0,5-25

Максимум нормы, ммоль/л

5,9

Минимум нормы, ммоль/л

4,1

8.7.2. При первом использовании набора, а также при получении новой серии набора

«ГЛЮКОЗА-UTS» необходимо провести калибровку с использованием входящего в состав набора калибратора глюкозы.

8.7.3. Концентрация глюкозы в образце рассчитывается в ммоль/л на основании калибровочной прямой, рассчитанной автоматически и сохраненной в памяти биохимического анализатора.

8.7.4. Если полученная концентрация глюкозы в образце выше 25 ммоль/л, то исследование следует повторить: разбавить анализируемый образец 0,9% раствором NaCl в соотношении 1:1 и полученный результат определения умножить на 2.

9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

9.1. Набор реагентов «ГЛЮКОЗА–UTS» должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2..+8 °С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре до +25 °С не более 5 суток. Замораживание компонентов набора не допускается.

9.2. Срок годности набора 18 месяцев с даты изготовления.

9.3. Реагент после вскрытия флакона может храниться при температуре +2..+8 °С в защищенном от света месте в течение всего срока годности в плотно закрытом флаконе.

9.4. Калибратор после вскрытия флакона может храниться при температуре +2..+8 °С в защищенном от света месте в течение 1 месяца в плотно закрытом флаконе.

9.5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.

Список литературы

1.  Kaplan L. A. Glucose. Kaplan A. et al. Clin. Chem. The C. V. Mosby Co. St. Louis. Torоnto, Prinston 1954; .

2.  Trinder P. Ann Clin Biochem, 1989; 624-633.

3.  Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

4.  Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.

Производится по заказу /О Юнимед».

По вопросам, касающимся качества набора «ГЛЮКОЗА–UTS» следует обращаться в /О ЮНИМЕД» Москва, ул. Касаткина, 3а; Тел. (4, 1-31,

Факс: (4;

E-mail: *****@***ru; http://www. *****

Источник: http://pandia.ru/text/78/060/30477.php

Глюкоза-ФКД (реагент для фотометрического определения содержания глюкозы) (уп. №10), 1000 мл

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора реагентов для количественного определения содержания глюкозы
в сыворотке и плазме крови человека глюкозооксидазным методом

«ГЛЮКОЗА - UTS»

Набор «ГЛЮКОЗА - UTS» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ.

Регистрационное удостоверение № ФСР 2009/05457

Информация для заказа набора «ГЛЮКОЗА - UTS»

где v – объем фотометрической ячейки анализатора.

1. НАЗНАЧЕНИЕ

1.1. Набор реагентов «ГЛЮКОЗА - UTS» предназначен для определения концентрации глюкозы в сыворотке и плазме крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний и контроля проводимого лечения пациентов.

1.2. Глюкоза является одним из важнейших компонентов крови, ее количество отражает состояние углеводного обмена. Содержание глюкозы в крови повышается при сахарном диабете, эпидемическом энцефалите, повышении гормональной активности щитовидной железы и т.д. На этом основано клиническое значение анализа.

1.3. Потенциальный риск применения набора – класс 2а. Основной риск косвенный и связан с возможностью получения неверного результата анализа, что может привести к неправильно поставленному диагнозу и назначению неэффективного лечения пациента. Для снижения указанного риска необходимо в каждой аналитической серии контролировать качество результатов анализов с применением контрольных сывороток в соответствии с ОСТ 91500.13.0001-2003.

2. ПРИНЦИП МЕТОДА

2.1. Глюкозооксидаза катализирует окисление ?-D-глюкозы с образованием эквимолярных количеств глюконовой кислоты и перекиси водорода (1). Перекись водорода под действием пероксидазы в реакции с 4-аминоантипирин и фенолом образует окрашенный продукт – хинонимин (2), интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации глюкозы в анализируемом образце и измеряется фотометрически при длине волны 505 (490-550) нм [1,2].

?-D-Глюкоза + H2O + O2Глюкозооксидаза Глюконовая кислота + Н2О2 (1)


2О2 + 4-аминоантипирин + Фенол ПероксидазаХинонимин + 4Н2О (2)

2.2. Фотометрическое измерение основано на наличии пика поглощения с максимумом при длине волны 505 нм молекулами хинонимина. Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет при этой длине волны. Таким образом, увеличение оптической плотности реакционной смеси пропорционально интенсивности окраски хинонимина и, следовательно, прямо пропорционально концентрации глюкозы в пробе.

3. СОСТАВ НАБОРА

3.1. Набор реагентов «ГЛЮКОЗА - UTS» поставляется в виде двух растворов: Реагента и калибратора.

Компоненты и их состав:

Наименование

Состав

Концентрация

Реагент

Фосфатный буфер, pH 7,5

Фенол

Глюкозооксидаза

Пероксидаза

4-аминоантипирин

100 ммоль/л

5 ммоль/л

>10 000 MЕ/л

>2 000 MЕ/л

0,5 ммоль/л

Калибратор

Водный раствор глюкозы

5,55 ммоль/л

4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

4.1. Набор обеспечивает линейную область определения концентрации глюкозы в диапазоне от 0,5 до 25 ммоль/л, отклонение от линейности не превышает 2,5%.

4.2. Чувствительность – не более 0,5 ммоль/л

4.3. Воспроизводимость - коэффициент вариации результатов определений – не более 2,5%.

4.4. Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным глюкозооксидазным методом.

4.5. Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется использовать сывороточные калибраторы, аттестованные по концентрации глюкозы глюкозооксидазным методом.

4.6. Нормальные величины концентрации глюкозы в сыворотке или плазме взрослого человека составляют 4,1-5,9 ммоль/л [3].

4.7. Перечень лекарственных препаратов, влияющих на определение концентрации глюкозы, приведены в обзоре [4].

5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

5.1. Реагент содержит фенол и 4-аминоантипирин. Следует избегать попадания этих реагентов на кожу и слизистые. В случае попадания их на кожу и слизистые оболочки необходимо промыть поражённые участки большим количеством проточной воды.

5.2.  При выполнении лабораторного исследования необходимо соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).

5.3. При работе с биологическими пробами следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

6.1. Для выполнения анализа по определению концентрации глюкозы с применением набора реагентов «ГЛЮКОЗА – UTS» рекомендуется использовать фотометр, фотоэлектроколориметр, полуавтоматический или автоматический биохимический анализаторы, позволяющие выполнять измерение поглощения оптической плотности при длине волны 505 (490-550) нм (режим по конечной точке), и обеспечивающие термостатирование фотометрической ячейки при температуре

+(37±0,5) ОС.

6.2. Общелабораторное оборудование.

7. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

7.1. Негемолизированная сыворотка или плазма крови.

7.2. Сыворотку или плазму крови следует отделить от форменных элементов крови немедленно после взятия крови.

7.3. Для замедления гликолиза и предотвращения свертывания при заборе крови использовать пробирки, содержащие антикоагулянт фторид натрия.

7.4. Образцы сыворотки или плазмы для проведения анализа на содержание глюкозы стабильны не более 3-х суток при +(2-8) ОС [3].

8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

8.1. Реагент и калибратор готовы к использованию.

8.2. Проведение ручного анализа с использованием фотометра или фотоэлектроколориметра.

8.3. Отобрать компоненты реакционной смеси с использованием пипеточных дозаторов в объемах, указанных в таблице:

Внести в кювету

Анализируемая проба, мкл

Калибровочная проба, мкл

Холостая проба, мкл

Реагент

1000

1000

1000

Калибратор

10

H2O

10

Сыворотка или плазма крови

10

8.4. Пробы тщательно перемешать и инкубировать при температуре +(37±0,5) ОС в течение 5 минут или при комнатной температуре (+18…+25 ОС) в течение 10 минут.

8.5. Измерить оптическую плотность анализируемой пробы и калибровочной пробы против холостой пробы в оптической кювете при длине волны 505 (490-550) нм. Окраска раствора стабильна в течение 30 минут.

Концентрацию глюкозы в сыворотке крови или плазме (ммоль/л) определить по формуле:

где: С – концентрация глюкозы в анализируемом образце сыворотки или плазмы в моль/л;

Аобр – оптическая плотность анализируемой пробы отн. холостой пробы, ед. опт. плотн.;

Акал – оптическая плотность калибровочной пробы отн. холостой пробы, ед. опт. плотн.;

Cкал – концентрация глюкозы в калибраторе, равная 5,55 ммоль/л.

8.6. Если полученная концентрация глюкозы в образце выше 25 ммоль/л, то исследование следует повторить: разбавить анализируемый образец 0,9% раствором NaCl в соотношении 1:1 и полученный результат определения умножить на 2.

8.7. Для выполнения измерений на полуавтоматическом или автоматическом биохимическом анализаторах следует:

8.7.1. Установить программу определения концентрации глюкозы согласно таблице:

Наименование параметра

Значение

Метод измерения

Конечная точка

Длина волны, нм

Основная 505 (490-550), дифференциальная 600

Измерение против

дист. вода

Температура реакции

37 ОС

Единица измерения

ммоль/л

Число знаков после запятой

2

Изменение оптической плотности

Увеличивается

Соотношение реагент/проба

100:1

Концентрация калибратора, ммоль/л

5,55

Время реакции, мин

5 (37 ОС)

Верхний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.

0,3

Нижний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.

0

Границы линейности, ммоль/л

0,5-25

Максимум нормы, ммоль/л

5,9

Минимум нормы, ммоль/л

4,1

8.7.2.При первом использовании набора, а также при получении новой серии набора

«ГЛЮКОЗА-UTS» необходимо провести калибровку с использованием входящего в состав набора калибратора глюкозы.

8.7.3. Концентрация глюкозы в образце рассчитывается в ммоль/л на основании калибровочной прямой, рассчитанной автоматически и сохраненной в памяти биохимического анализатора.

8.7.4. Если полученная концентрация глюкозы в образце выше 25 ммоль/л, то исследование следует повторить: разбавить анализируемый образец 0,9% раствором NaCl в соотношении 1:1 и полученный результат определения умножить на 2.

9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

9.1. Набор реагентов «ГЛЮКОЗА–UTS» должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2..+8 °С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре до +25 °С не более 5 суток. Замораживание компонентов набора не допускается.

9.2. Срок годности набора 18 месяцев с даты изготовления.

9.3. Реагент после вскрытия флакона может храниться при температуре +2..+8 °С в защищенном от света месте в течение всего срока годности в плотно закрытом флаконе.

9.4. Калибратор после вскрытия флакона может храниться при температуре +2..+8 °С в защищенном от света месте в течение 1 месяца в плотно закрытом флаконе.

9.5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.

Список литературы

  1. Kaplan L.A. Glucose. Kaplan A. et al. Clin. Chem. The C.V. Mosby Co. St.Louis. Torоnto, Prinston 1954; 1032-1036.

  2. Trinder P. Ann Clin Biochem, 1989; 624-633.

  3. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

  4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.

Производится ООО «Эйлитон» по заказу ЗАО «А/О Юнимед».

По вопросам, касающимся качества набора «ГЛЮКОЗА–UTS» следует обращаться в ЗАО «А/О ЮНИМЕД» по адресу: 129301, Москва, ул. Касаткина, 3а; Тел. (495) 734-91-31, 8-800-333-91-31,

Факс: (495) 564-86-41;

E-mail: [email protected];



Похожие документы:

Источник: https://gigabaza.ru/doc/103418.html
Еще по теме